Procédure : Marché passé selon les modalités librement
définies par le pouvoir adjudicateur
Identification de l'organisme qui passe le marché : Regie ESPCI ParisTech 10 rue Vauquelin 75231 Paris CEDEX 05
Nom et adresse du service acheteur : Laboratoire Laboratoire de Neurobiologie, ESPCI ParisTech, 10 rue Vauquelin, 75231 Paris CEDEX 05
Objet du marché : ACHAT D' UN MICROSCOPE CONFOCAL POUR IMAGERIE CALCIQUE
Descriptif technique :
MICROSCOPE CONFOCAL
Le lot concerne l’acquisition d’un microscope optique grand champ et
confocal. Ce matériel, à usage multiutilisateur, est destiné à
l'imagerie calcique in vivo par deux approches différentes. La première
est une imagerie de fluorescence confocale "classique", qui devra être
entièrement incluse dans le matériel fourni. Les critères importants
pour ce mode de fonctionnement sont la sensibilité du microscope à
illumination relativement faible pour éviter le photoblanchiment et les
effets toxiques de l'irradiation et la vitesse pour acquérir des piles
d'images (X,Y,Z,t) sur une profondeur Z importante. Ce microscope sera
également utilisé en mode grand champ avec une illumination structurée.
Les parties illumination et détection correspondantes sont développées
par l'acheteur, mais le microscope devra comporter un port optique
indépendant de celui utilisé par le confocal et un dispositif de
commutation pour permettre de basculer l'ensemble du flux lumineux (en
direction et provenant de l'objectif) vers l'un ou l'autre des deux
ports en conservant l'alignement optique des montage associés. L'un des
points critiques pour cette utilisation est la proximité du port
optique dédié à cette imagerie du plan focal arrière de l'objectif. La
situation est similaire à celle des ports utilisés pour de la détection
non-descannée en microscopie biphotonique. Il faut au niveau du port
pouvoir collecter au mieux l'ensemble du flux lumineux sortant de
l'objectif, c'est-à-dire ne pas avoir de limitations de champ ou
d'ouverture supplémentaires à celles de l'objectif. Ces deux modes
d'utilisation pourront être couplés à de l'électrophysiologie.
Les caractéristiques minimales ou désirées pour le matériel sont
précisées avec plus de détail ci-dessous. Le matériel comprendra les
éléments les éléments suivants:
-un microscope droit avec déplacement X,Y et Z motorisés.
-une platine piézoélectrique pour le déplacement vertical de
l'échantillon ou un système piézoélectrique pour le déplacement des
objectifs ou à la rigueur une motorisation en Z très rapide. Le système
doit typiquement permettre de prendre 5 images/seconde dans 5 plans
horizontaux différents séparés d'au moins 40µm chacun.
-un laser pour l'excitation de l'EGFP, de préférence tout solide, à
488nm.-l'optique
• pour le couplage au microscope de l'excitation visible
• un diaphragme de filtrage confocal réglable
• un scanner optique
• un ensemble d'objectifs de microscope pour l'imagerie in vivo en mode
"dipping"
• l'optique pour la détection de la fluorescence dans les différentes
configurations décrites ci-dessous
-un ensemble de détecteurs pour la partie confocale
-une électronique assurant l'ensemble des fonctions nécessaires au
microscope, en particulier la digitalisation des signaux de
fluorescence, le contrôle des détecteurs, du scanner et des éléments
motorisés
-un logiciel gérant l'ensemble des modes d'acquisition souhaités.
Spécifications du statif de microscope
• La stabilité du microscope est un point important et un microscope
droit à platine fixe, de type destiné à l'électrophysiologie, serait
préféré.
• déplacement X,Y et Z motorisés de préférence, avec une
reproductibilité du déplacement meilleure que 1µm, une résolution
meilleure que 100nm et une course d'environ 100mmX100mm si possible. Le
déplacement vertical doit être de plus de 25mm.
• éclairement en lumière blanche par transmission. Pour les expériences
de electrophysiologie, un mode d'illlumination permettant d'observer
les contours cellulaires sans marquage du type "Dodt" est nécessaire,
avec un éclairement dans le proche infrarouge.
• Au moins trois port optiques, le premier pour l'observation en
lumière blanche avec basculement entre l'observa tion visuelle et un
mode caméra, le second pour le confocal et le troisième pour
l'illumination structurée. Le port pour l'illumination structuré doit
être aussi près que possible du plan focal arrière de l'objectif,
typiquement moins de 150mm sans élément diaphragmant de moins de 25mm
dans le chemin optique. La commutation entre les différentes voies ne
doit pas perturber l'alignement.
• Si possible, deux autres ports pour l'épifluorescence (un port pour
l'illumination et un pour la détection) incluant l'éclairage pour
fluorescence et avec un filtre passe grande longueur d'onde en émission
pour GFP.
Spécificités du système de déplacement vertical piézoélectrique
• un système de translation piézoélectrique des objectifs ou de
l'échantillon pour permettre des déplacements verticaux rapides ne
limitant pas la vitesse d'imagerie du scanner lors de l'acquisition de
piles d'images tridimensionnelles (XYZ). Typiquement il faut acqué rir
au moins 5 images par seconde avec une résolution de 512x512 pixels,
avec une distance verticale entre chaque plan de 40µm
• Le déplacement vertical piezoélectrique doit être de 200µm ou plus
Spécificités des lasers visibles à livrer avec l'appareil et modulation
• L'appareil sera livré avec une source laser permettant l'imagerie de
l'EGFP, de préférence toute solide, à488nm.
• La possibilité d'améliorer l'appareil en acquérant ultérieurement
d'autres sources laser est souhaitée.
• Le système devra comporter un système de type AOTF ou un modulateur
acoustooptique sur chaque voie d'excitation pour moduler rapidement
l'intensité d'excitation.
Spécifications de l'optique
Spécifications générales
• l'ensemble des éléments optiques présenteront une grande stabilité,
en particulier pour garder un filtrage confocal efficace (excitation et
trou de filtrage parfaitement centrés et conjugu és optiquement) sur
une durée d'au moins un an dans des conditions standard d'utilisation
du microscope installé sur table antivibratoire.
• l'ensemble des éléments optiques seront adaptés (en particulier leur
tenue au flux) pour les excitations visibles choisies.
Spécificités du système de balayage du faisceau laser
• le système de balayage du faisceau laser devra assurer une qualité de
faisceau proche de la limite de diffraction sur l'ensemble du champ
(voir objectifs).
• La vitesse minimum souhaitée est de 5 images par seconde avec une
résolution 512x512 pixels (mode bidirectionnel).
• La correction de phase en mode bidirectionnel devra être efficace et
ce mode de balayage devra présenter des caractéristiques semblables au
mode unidirectionnel.
• Le champ du scanner au niveau de l'échantillon devra être de l'ordre
de 800µm ou plus avec un objectif X20.
Spécifications des objectifs
• un ou deux ob jectifs de grande ouverture numérique (NA de l'ordre de
1) du type "dipping" pour l'imagerie in vivo, un 20X et éventuellement
un 40X
• Le porte-objectif pourra ne comprendre qu'une position. Deux
positions seraient un avantage et dans ce cas un objectif de faible
grossissement (typiquement X5) sera inclus dans l'offre.
Spécifications de l'optique de détection et des détecteurs
• Au moins trois canaux de détection de fluorescence simultanés associé
au mode confocal (ayant traversé le même trou de filtrage confocal)
sont nécessaires.
• Tenu compte du choix de la longueur d'excitation (488nm), les filtres
d'émission et le miroir dichroique doivent avoir des fronts
suffisamment raides pour éliminer l'excitation laser à 488nm et ne pas
perdre l'émission de l'EGFP dont le maximum est à 509nm. Typiquement le
filtre d'émission devrait atteindre un taux de rejection meilleure que
106 à 488, une transmission d'au moins 60% à 505nm et d 'au moins 90% à
509.
• Des photomultiplicateurs de bonne efficacité quantique, faible bruit
et grande dynamique et un système de digitalisation performant sont
requis.
• Une efficacité globale de détection élevée est un point crucial. Dans
cette optique, la possibilité d'équiper l'une des voies d'un
photomultiplicateur de grande efficacité quantique dans le domaine
d'émission de l'EGFP, du type GaAsP serait un avantage. Si une telle
option n'est pas actuellement mais prochainement disponible, la
compatibilité du microscope avec cette évolution sera appréciée.
Spécifications du logiciel
• un logiciel permettra l'ensemble des modes d'imagerie suivant:
-t (position fixe si possible)
-Xt mode ligne
-XY (imagerie classique)
-XYt (série d'images dans le temps à intervalle et vitesse donnés)
-XYZ (pile tridimensionnelle)
-XYZt
possibilité d'excitation séquentielle des différents chromophores pour
éviter la diaphonie entre voies de détection ou d'excitation simultanée
des différents chromophores, même si le microscope n'est dans un
premier temps équipé d'une seule source laser.
-zoom sur partie rectangulaire sélectionnée de l'image et si possible
éventuellement rotation
-choix mode bidirectionnel ou alterné
• La vitesse de digitalisation doit permettre d'exploiter la vitesse
maximale du scanner (au moins 2 images par seconde) sur des images de
résolution au moins 1024X1024 pixels et une dynamique de 12 bits
minimum est demandée.
• En modes XYZ et XYZt, il doit être possible de programmer une
modification du gain des photomultiplicateurs, de l'intensité
d'excitation et éventuellement du diamètre du trou de filtrage confocal
qui s'effectue automatiquement au cours de l'acquisition de la pile
d'images qui permet de compenser la chute de signal lorsque l'on image
plus profondément dans le tissu.
Compatibilité du matériel avec des options et améliorations
ultérieures
Bien que le budget actuel ne permette pas l'achat de toutes les
extensions possibles sur ce types de microscope, le système devra
rester modulable. En particulier
• signaux de synchronisation avec le balayage.
• La possibilité d'améliorer le microscope confocal avec des détecteurs
de grande sensibilité sera appréciée
• L'ajout de nouvelles sources lasers doit être possible.
DOCUMENTATION :
Le produit devra être accompagné d’une documentation et sera
obligatoirement accompagné de son manuel d’utilisation.
La documentation devra obligatoirement inclure :
- un descriptif complet des diverses parties des instruments avec leurs
spécifications techniques,
- un mode d’emploi et un guide d’utilisation des instruments,
une description détaillée des caractéristiques techniques requises
pour l’installation et le fonctionnement de l’appareil (dimensions,
alimentation et consommation en fluides divers, charge au sol,
climatisation et puissance thermique dégagée, etc.).
GARANTIE :
Deux ans de garantie sont demandés.
LIVRAISON :
Le prix doit inclure la livraison au quatrième étage sans ascenseur. Un
monte-charge est actuellement disponible jusqu'au troisième étage mais
son fonctionnement ne peut être garanti.
CONDITIONS DE RECEPTION DU MICROSCOPE
A/ VERIFICATION PREALABLE DU MATERIEL PAR LE TITULAIRE :
Le titulaire s’engage à vérifier le bon fonctionnement du matériel
commandé par l’Ecole Supérieure de Physique et de Chimie industrielles
de la Ville de Paris avant sa livraison.
B/ VERIFICATION ET RECEPTION PAR ESPCI
1) réception quantitative du matériel :
Elle s’effectue à la réception du matériel par la personne habilitée du
service destinataire .
Elle s’effectue dans les 8 jours ouvrés suivant la livraison.
2) réception qualitative du matériel :
Elle s’effectue dans les six semaines suivant la livraison dans les
conditions définies ci-dessous. Elle comprend deux étapes : la
vérification d’aptitude et la vérification de service régulier.
a ) vérification d’aptitude
La vérification d‘aptitude a pour but de constater que le matériel
livré présente les caractéristiques techniques qui les rendent aptes à
remplir les fonctions précisées dans la documentation du titulaire. Le
délai imparti à la personne publique (Ecole Supérieure de Physique et
de Chimie Industrielles) pour procéder à la vérification d’aptitude et
notifier sa décision , est de six semaines n'incluant pas la période
mi-juillet-fin août à partir de la mise en ordre de marche.
Si la vérification d’aptitude est positive, l'Ecole procède à la
vérification de service
régulier.
Si la vérification d’aptitude est négative, l'Ecole prend une décision
d’ajournement ou de rejet. En cas
d’ajournement, le titulaire, après intervention sur le matériel,
notifie une nouvelle mise en ordre de marche.
b) vérification de service régulier
La vérification de service régulier a pour but de constater que le
matériel fourni est capable d’assurer un service régulier dans les
conditions normales d’exploitation. La régularité du service s’observe,
à partir du jour où les éléments ont été déclarés aptes, pendant une
durée de deux mois.
Le service est réputé régulier si la durée cumulée sur ces deux mois
des indisponibilités imputables à chaque élément de matériel ne dépasse
pas,7,5% de la durée, sur ces deux mois, de la période d’intervention.
A l’issue de la période de vérification de service régulier, la
personne publique dispose de sept jours pour notifier au titulaire sa
décision.
Si la vérification de service régulier est positive, l'Ecole prononce
la réception des
prestations .
Si la vérification de service régulier est négative, l'Ecole prononce
soit l’ajournement
des prestations, avec vérification de la régularité du service pendant
une période supplémentaire de deux mois, soit la réception avec
réfaction, soit le rejet des prestations.
Article de nomenclature :54.08 Appareils
de spectroscopie RMN/métrologie des grandeurs magnétiques.
Lieu d'exécution ou de livraison : ESPCI ParisTech, 10 rue Vauquelin, 75231 Paris CEDEX 05
Adresse de facturation : Service Financier et Comptable, ESPCI ParisTech, 10 rue Vauquelin, 75231 Paris CEDEX 05
Adresse de retrait des dossiers: sans objet
Date prévisionnelle de début des préstations ou de commencement
des travaux : octobre 2011
Modalités de financement : Budget d'investissement de la regie ESPCI ParisTech 2011
Modalités de remise des offres :
Date limite de dépôt des offres : mercredi 12 octobre 2011
Délai de validité des offres : 2 mois à compter de la date limite de réception des offres
Critères de sélection des offres :
60% Critères techniques
30% Prix
10% Délais d’exécution ou de livraison
Contact technique :
Paul Tchénio
Téléphone : 01 40 79 52 26
E-mail : paul.tchenio@espci.fr
Options :
Possibilité d'achats dans le cadre de marchés complémentaires conclus
sans nouvelle mise en concurrence.
Informations complémentaires :
Pièces à fournir :
Le candidat doit fournir une offre comportant les éléments répondant
aux critères de sélection.
Cette offre doit être accompagnée :
Les documents réclamés ci dessus peuvent être remplacés par les documents contenant des informations équivalentes.
Les documents doivent être rédigés en français.
Instance chargée des procédures de recours :
Tribunal administratif de Paris, 7, rue de Jouy 75181 Paris Cedex 04,
F-75181 Paris. Tél. 01 44 59 44 00